اختبار التدفق الجانبي وتاريخ قصير

ال اختبار التدفق الجانبي (LFT) هو اختبار يُعرف أيضًا باسم جهاز التدفق الجانبي (LFD) ، أو الفحص المناعي للتدفق الجانبي ، أو الاختبار السريع. إنه جهاز بسيط مصمم لاكتشاف وجود مواد مستهدفة في عينات سائلة دون الحاجة إلى معدات متخصصة ومكلفة. يتم استخدامها على نطاق واسع للتشخيصات الطبية في المنزل ونقطة الرعاية والمختبر. على سبيل المثال ، منزل اختبار الحمل هو LFT الذي يكتشف هرمونات معينة. عادةً ما يكون هناك مستضد بيولوجي ، العديد من اختبارات التدفق الجانبي هي اختبارات مستضد سريعة (الفئران أو الفن).تعمل LFT على نفس مبدأ كروماتوجرافيا التقارب في مقايسة المناعة المناعية المرتبطة بالإنزيم (ELISA). في الأساس ، تدير هذه الاختبارات عينة سائلة على طول سطح اللوحة مع جزيئات تفاعلية ، تُظهر نتيجة إيجابية أو سلبية بصريًا. وتستند هذه الوسادات على سلسلة من الأسرة الشعرية مثل الأوراق الورقية المسامية البوليمرات المجهرية أو البوليمرات الملبدة. يتمتع الوسادات بالقدرة على نقل السوائل تلقائيًا (مثل البول والدم واللعاب).تعمل وسادة العينة كإسفنجة وتحمل سائل عينة زائد. بعد نقع ، يتدفق السائل إلى وسادة متزامنة ثانية ، حيث تقوم الشركة المصنعة بتخزين جزيئات نشطة بيولوجية مجففة بالتجميد تسمى المترافق (انظر أدناه) في مصفوفة السكر الملح. يحتوي على جميع الكواشف اللازمة لتحسين التفاعل الكيميائي بين الجزيء المستهدف (مثل المستضد) وشريكه الكيميائي يجمد على سطح الجسيمات (مثل الأجسام المضادة). وهذا يمثل الجزيئات ذات الاهتمام أثناء مرورها عبر اللوحة والاستمرار عبر الاختبار والمتابعة خطوط التحكم. يعرض خط الاختبار إشارة ، وعادة ما يكون اللون في اختبار الحمل. يحتوي خط التحكم على يجند التقارب ويوضح ما إذا كانت العينة تتدفق والجزيئات الحيوية في الوسادة المترافق نشطة. بعد مرور مناطق التفاعل هذه ، يدخل السائل المادة النهائية المسامية ، الفتيل ، الذي يعمل ببساطة كحاوية نفايات.يمكن تنفيذ LFT كمسابقة أو اختبار شطيرة.

تاريخ

تم اشتقاق LFT من كروماتوجرافيا الورق ، التي طورها مارتن و Synge في عام 1943 وتوضيحها Consden و Gordon و Martin في عام 1944. بعد عام 1945 ، انفجر النشاط في هذا المجال. تم تطوير تقنية ELISA في عام 1971. قدمت مجموعة من براءات الاختراع LFT ، بما في ذلك الدعوى الموضحة أدناه 6،485،982

ملخص

الجزيئات الملونة

من حيث المبدأ ، يمكن استخدام أي جزيئات ملونة ، ولكن يتم استخدام جزيئات الذهب ذات اللاتكس (الأزرق) أو النانو (الأحمر) بشكل شائع. تظهر الجزيئات الحمراء بسبب الرنين المترجمة السطحي. ولكن هذه تتطلب استخدام قارئ إلكتروني لتقييم نتائج الاختبار.

اختبار شطيرة

عادةً ما تستخدم طرق السندويش للتحليلات الكبيرة لأنها تميل إلى وجود مواقع ربط متعددة. حيث يتم ترحيل العينة عبر الفحص ، فإنها تواجه أولاً مفترسة ، جسم مضاد محدد لتحليل الاهتمام المسمى بعلامة مرئية ، وعادة ربط وترحيل مع التحليلات المستهدفة في العينة حتى تصل إلى خط الاختبار. يحتوي خط الاختبار أيضًا على أجسام مضادة مثبتة محددة لتحليل الاهتمام الذي يرتبط بالجزيئات المترابطة المحلية المرحلة. ثم يعرض تغييرًا بصريًا ، مما يؤكد وجود الجزيء المستهدف. معظم فحوصات السندوتشات لها أيضًا خط تحكم موجود بغض النظر عن وجود أو عدم وجود تحليل اهتمام لضمان الوظيفة المناسبة لوسادة التدفق الجانبي. -يتم استخدام الاختبار القائم على شطيرة التكلفة بشكل شائع في اختبارات الحمل المنزلية للكشف عن الغدد التناسلية المشيمية البشرية (HCG) في بول النساء الحوامل.

فحوصات تنافسية

عادة ما يتم استخدام فحوصات تنافسية للتحليلات الأصغر لأن التحليلات الأصغر لها مواقع ارتباط أقل. تواجه العينة أولاً الأجسام المضادة الموجه ضد التحليلات المستهدفة المسمى مع الملصقات البصرية (الجسيمات الملونة). يحتوي خط الاختبار على تحليل الاهتمام على السطح. لا توجد أهمية في العينة ، سترتبط الأجسام المضادة غير المقيدة بجزيئات التحليل المقطوعة هذه ، مما يعني أنه سيتم عرض علامة مرئية. إلى التحليل المتحمل في خط الاختبار ، لذلك لا يتم عرض علامات بصرية. هذا يختلف عن تحليل السندويش حيث أن غياب النطاق يعني أن الحليل موجود.

الاختبارات الكمية

تم تصميم معظم LFTS للعمل على أساس نوعي بحت. ومع ذلك ، يمكن قياس قوة خط الاختبار لتحديد مقدار التحليل في العينة. تستخدم بعض الشركات أجهزة تشخيصية محمولة تسمى قراء التدفق الجانبي لتوفير نتائج فحص كمية بالكامل. من خلال الإضاءة مع طول موجي فريد من الضوء مع تقنية الكشف عن CMOS أو CCD ، يمكن إنشاء صور غنية بالإشارات لخط الاختبار الفعلي. باستخدام خوارزميات معالجة الصور المصممة لأنواع اختبار محددة ووسائط ، يمكن ربط شدة الخط بتحليل تركيزات التحليل . Detekt Biomedical L.L.C.Manufactions أحد منصة جهاز التدفق الجانبي المحمولة. يعد الضخ الشعري لسوائل العينة وسيلة أخرى للانتقال من النوعية إلى النتائج الكمية. على سبيل المثال ، أثبت العمل الأخير أن الضخ الشعري له معدل تدفق ثابت مستقل عن اللزوجة السائلة والطاقة السطحية.